1、采集方法:通常采用静脉抽血,使用无菌采血管,可以选择含有或不含有抗凝剂的管子,视后续处理和分析需求而定。样本量:通常需要1-2 mL血液。血液样本处理:离心:将血液样本在4°C下进行离心(例如,3000 g,10分钟),以分离血浆或血清。
2、基于超高效液相色谱-质谱联用技术的非靶向代谢组学分析流程一般包括: 样品的收集和预处理、代谢物提取、LC-MS全扫描检测、数据预处理、统计分析及差异物结构鉴定。 其中第一步,样品的收集和重复设置尤为重要,直接关系到实验结果以及数据分析。
3、例如,在匹配样本设计中,单个血液样本可以分成两份,其中一份在代谢平台上分析,另一份在转录平台上分析。然而,匹配样本设计可以基于同一生物样本小份体液,但也可以不一定要基于,例如在同一时间点从同一个人采集的血液样本和另一组织活检样本,即匹配。 预处理。
4、数据预处理:峰匹配和归一化:对以上结构鉴定得到的数据进行预处理,包括峰匹配、归一化处理,确保数据质量适合进行PCA分析。主成分分析(PCA):数据导入:将处理后的代谢物数据导入统计软件或专用的生物信息学工具。
5、百趣生物 成立时间:2012(最早是阿趣生物)地点:上海 市场份额:14 公司人数:约300人 公司介绍:国内最早专门从事代谢组学科研服务的公司之一,主打非靶标代谢组学检测分析服务,其优势是数据质量,据说能做到美国metabolon的水平,CV10%。
6、质谱(MS)是临床检测生物大分子的有效方法。近年来质谱技术的进步有力地推动了蛋白质组学和代谢组学的研究,使临床将蛋白组学和代谢组学引入疾病的早期诊断成为现实。
使用 p.valcalc 函数进行差异分析,使用robust vesion的t-test获取p值,公式可以查看函数源码,用到了 weightedVar加权方差 。
如下图,火山图体现出一组数据(Test/Con)之间的差异幅度和统计学意义分布。X轴代表log2(FC);Y轴代表-log10(q value),灰色代表无差异基因,红色代表上调基因,绿色代表下调基因。X轴的取值可以是FC,也可以是log2处理后的值。
代谢物提取,一般要求每组至少10个样; 在所有提取好的样本中取等量混合作为QC; QC样本与实验样本穿插上机,开始十个QC,结尾三个QC,中间每十个样本穿插一个QC样本 。得到质谱谱图数据经软件处理后得到峰表。
代谢物提取,一般要求每组至少10个样;在所有提取好的样本中取等量混合作为QC;QC样本与实验样本穿插上机,开始十个QC,结尾三个QC,中间每十个样本穿插一个QC样本。这里我们采用基于秩的检验方法,其中基因集富集分析(GSEA)是在转录组数据背景下进行代谢路径分析的一个常见例子,它也可以应用于代谢组数据。
在中心法则的指导下,基因组、转录组、蛋白组通常以 信息流 的方式呈现,而代谢组被认为是新陈代谢的结果。
空间共定位分析是一种代谢物的空间相关性分析,选择一种目标代谢物后,进行空间相关性计算,输出与目标代谢物空间表达趋势一致的代谢物List,可以帮助开展对该区域中代谢物表达模式和代谢网络的分析工作。