了解小白鼠的体内结构。在小白鼠体内注射发光材料是为了让小鼠发光,靠的是生物发光过程。发光后小白鼠会具有高灵敏度生物发光和荧光成像性能,使我们能够更全面地了解小白鼠体内复杂的细胞活动和基因行为。小白鼠活体光学成像系统,通过配备的高灵敏CCD相机、不透光成像室和全自动化的分析功能。
小动物活体成像技术是采用高灵敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和图像处理软件,使得可以直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。在拥有激发光多光谱分析功能的活体成像系统出现以前,科学家们被迫采取各种方法来减少动物自发荧光,比如:采用无荧光素鼠粮饲养小鼠、使用裸鼠等。
其后用荧光标记物来研究其行为,观察结果真实可靠。\x0d\x0a那如何选择自己最合适的活体荧光成像系统呢?本文试从以下几点来进行分析。\x0d\x0a\x0d\x0a 荧光标记的选择\x0d\x0a活体荧光成像技术主要有三种标记方法:荧光蛋白标记、荧光染料标记和量子点标记。
在光路上,NightOWLⅡLB983系统采用可调节的激发光能量设置,能量可在0%至100%之间自动调节,确保在长时间多次成像中输出稳定的激发光,配备在线光能反馈控制装置,实时监控并补偿光源能量变动,确保光源光效的稳定性。上海科远迪生物科技有限公司提供部分荧光配件及实验服务,可进行不同目标的荧光成像实验。
1、化学发光分析是一种独特的化学分析技术,其原理基于化学反应过程中产生的光现象。当化学反应生成的某些物质处于激发态时,它们会吸收能量,导致电子跃迁到高能级。在这个过程中,这些激发态分子可能通过辐射跃迁释放出能量,或者将能量传递给其他可以发光的分子,促使后者也发生类似的跃迁,从而引发发光现象。
2、化学发光免疫分析是一种独特的生物标记技术,它结合了免疫反应与发光原理,用于微量抗原或抗体的检测。它在临床应用中展现出广泛的应用领域,包括甲状腺激素、生殖激素、垂体和皮质激素监测、贫血因子、肿瘤标志物、感染疾病诊断、糖尿病相关指标、心脏标志物、病毒检测、过敏疾病以及治疗药物监测等。
3、化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA)是一种集高灵敏度化学发光测定与免疫反应特异性于一体的检测技术。
1、小鼠活体成像实验的一般步骤:实验动物准备:选择适合的小鼠品系,确保它们符合实验要求,并进行必要的驯化和适应环境。标记荧光探针或生物发光标记:根据研究需要,选择合适的荧光探针或生物发光标记物,对实验小鼠进行标记。
2、首先,确保实验环境与所需设备:实验器材:活体成像仪、电脑和IVIS系统软件主要试剂:荧光药物和LUC底物然后是动物选择和准备工作:开启仪器和电脑,待CCD温度降到-90度后,初始化IVIS系统并设定好图片保存路径和拍摄模式。在黑色96孔板中注入等量荧光药物,并按照特定波长进行成像设置。
3、荧光成像主要应用于裸鼠皮下移植瘤模型和SCID鼠尾静脉移植瘤模型的建立。裸鼠模型采用皮下移植法,将细胞悬液接种于裸鼠皮下,通过活体成像系统观测肿瘤生长情况。SCID鼠模型则采用尾静脉注射法,观测体内肿瘤生长与转移,每次观测前腹腔注射荧光底物,注射后10~25分钟进行活体成像。
4、小动物活体成像技术是采用高灵敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和图像处理软件,使得可以直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。在拥有激发光多光谱分析功能的活体成像系统出现以前,科学家们被迫采取各种方法来减少动物自发荧光,比如:采用无荧光素鼠粮饲养小鼠、使用裸鼠等。
5、以荧光探针为例,当罗丹明B通过尾静脉注射进入小鼠体内后,我们可以在小动物光学成像系统中观察到荧光在不同时间点的分布情况。2小时后,荧光开始显现,随着时间的推移,荧光分布逐渐清晰,24小时后,我们不仅能看到全身各脏器的荧光信号,还能在取材后的肿瘤、心、肝、脾、肺和肾中观察到细节。
1、钙成像技术在神经科学研究中的应用广泛,包括记录培养的神经元、脑片上神经元的活动、活体神经元活动的记录以及观察神经元树突和树突棘的活动。不同实验方法各有优势,如多通道在体电生理、双光子成像、光纤记录和微型显微镜等,选择取决于实验条件和需求。
2、MPLC利用了光遗传学中的遗传操作手段,通过对神经元进行基因编辑,使得特定神经元表达光敏蛋白。这些蛋白可以接受特定光波的激活或抑制信号,从而精准控制神经元的活性。在钙成像技术的辅助下,科研人员可以实时监测神经元在受到刺激时的钙离子浓度变化,反映其活跃状态。
3、对神经元的操作有时候需要在特定的时空区段内进行。双表达系统,如Cre/LoxP、Gal4/UAS等提供了模块化的、组织特异性的遗传操作手段,从而提高了操作的空间分辨率。病毒注射、光遗传学、化学遗传学等方法提供了暂时改变特定区域基因表达特性的的手段,从而提高了操作的时间分辨率。接下来再说第一种思路。
荧光素酶报告基因检测是一种基于萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)活性的生物荧光测定系统,利用萤火虫荧光素酶催化luciferin氧化成oxyluciferin,产生生物荧光。此技术常用于miRNA靶基因验证、启动子转录活性调控等研究。
双荧光素酶报告(Dual-Luciferase Reporter)实验是一种常用的遗传调控元件研究手段,通过构建包含荧光素酶基因的报告质粒,如将感兴趣的基因调控元件插入萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)上游,以及加入海肾荧光素酶(Rinilla luciferase)作为对照,来评估基因表达变化。
构建负责表达荧光素酶的载体:在实验中,通常将感兴趣的基因调控区域与荧光素酶基因关联起来,构建成双荧光素酶报告基因的表达载体。这个基因构建过程通常通过分子克隆技术来完成。转染细胞:将上述构建好的表达载体引入目标细胞中。
双荧光素酶报告基因实验原理是利用双荧光素酶作为荧光素酶的标记来研究基因表达与调控的机制。双荧光素酶报告基因实验是一种基因表达定量分析技术,通过将双荧光素酶Luciferase作为报告基因插入到需要研究的靶基因启动子区域或转录后区域,使其与靶基因协同表达。